国产精品乱码一区二区三区-亚洲三级综合在线-久久精品国产亚洲avapp下载-蜜桃久久久久久精品免费观看-天天躁日日躁狠狠躁日日躁

組胺是一種含氮的有機(jī)化合物，是由組氨酸在脫羧酶的作用下產(chǎn)生的。一般存在于皮膚、肺部和腸粘膜的肥大細(xì)胞中，當(dāng)發(fā)生炎癥的時(shí)候，就會(huì)釋放出組胺來(lái)了。組胺會(huì)讓血管舒張，增加毛細(xì)血管和微靜脈的管壁通透性，血漿進(jìn)入到組織中就會(huì)導(dǎo)致局部水腫。組胺的化學(xué)式為C5H9N3，分子量111.145，由咪唑環(huán)（含氮雜環(huán)）與乙胺基團(tuán)通過(guò)兩個(gè)碳原子連接構(gòu)成。組胺易溶于水，可溶于乙醇，微溶于乙醚，氯仿等。在日光下容易變質(zhì)，需避光保存。

檢測(cè)組胺含量的方法，實(shí)驗(yàn)室常用到高效液相色譜（HPLC）、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）、酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法、比色法等。以HPLC為例，簡(jiǎn)單的介紹一下過(guò)程。技術(shù)參數(shù)比較粗略，如果要詳細(xì)的操作步驟和參數(shù)，可咨詢或參考相關(guān)的文獻(xiàn)資料。

1.樣品前處理

使用0.4mol/L的高氯酸溶液提取樣品中的組胺，提取出來(lái)還要用10mg/mL的丹磺酰氯溶液進(jìn)行衍生化處理，便于后續(xù)的HPLC測(cè)定。衍生化處理，是為了提高檢測(cè)靈敏度。

2.色譜條件

C18色譜柱，250mm長(zhǎng)，4.6mm內(nèi)徑，5um粒徑；常用的流動(dòng)相為甲醇和乙酸銨，流速為1ml/min，紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)254nm，進(jìn)樣量10-20uL。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

用組胺的標(biāo)準(zhǔn)品配制出標(biāo)準(zhǔn)溶液母液，比如1mg/mL，梯度稀釋6個(gè)濃度點(diǎn)并記錄下來(lái)。衍生化處理后，進(jìn)樣到HPLC測(cè)各個(gè)濃度的色譜峰。由于標(biāo)品是相對(duì)純的，測(cè)出來(lái)的色譜峰要符合要求，在前期方法開(kāi)發(fā)的時(shí)候就要先調(diào)整好各個(gè)參數(shù)，避免出現(xiàn)錯(cuò)誤或浪費(fèi)現(xiàn)象。對(duì)各個(gè)濃度點(diǎn)測(cè)出來(lái)的色譜峰，記錄它們的保留時(shí)間，并對(duì)它們的峰面積分別進(jìn)行積分處理，對(duì)應(yīng)它的濃度，在表格中可以擬合出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。

4.樣品測(cè)定

樣品的測(cè)定過(guò)程是相似的，根據(jù)保留時(shí)間，找到色譜峰，并對(duì)色譜峰面積進(jìn)行積分，代入到回歸方程，計(jì)算出樣品溶液中的組胺含量。